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動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)中的常見術(shù)語

 更新時(shí)間:2024-03-19 點(diǎn)擊量:2316
  下面給出動(dòng)態(tài)光散射(DLS)技術(shù)中常見術(shù)語的描述性定義,這些術(shù)語出現(xiàn)在國際標(biāo)準(zhǔn)ISO 13321:1996 E 和 ISO 22412:2008中。
 
  1 Z-均粒徑
 
  動(dòng)態(tài)光散射中的Z-均粒徑,即累積分析法中的平均粒徑,這是該技術(shù)所得到的最主要和參數(shù)。在產(chǎn)品質(zhì)量控制過程中,Z-均粒徑是最有價(jià)值的參數(shù)。在國際標(biāo)準(zhǔn)中定義該均值為“強(qiáng)度平均粒徑”。
 
  Z-均粒徑只有在以下情況中,才能夠與其他方法測(cè)量的粒徑作比較:樣品是單峰分布,且分布非常窄;顆粒為球形或近似球形,并且溶解在合適的分散劑中,因?yàn)閆-均粒徑對(duì)樣品的微小變化非常敏感,比如少量的凝聚。應(yīng)該注意,Z-均粒徑是流體動(dòng)力學(xué)參數(shù),因此只適用于顆粒分散在溶液中的情況。
 
  2 累積分析法
 
  可以使用該方法分析動(dòng)態(tài)光散射實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的自相關(guān)函數(shù),在國際標(biāo)準(zhǔn)中有該計(jì)算過程的定義。這個(gè)計(jì)算式中包含多階展開式,但在實(shí)際中只使用前兩階參數(shù),即Z-均粒徑和描述顆粒粒度分布寬度的參數(shù)-多分散指數(shù)(PI)。Z-均粒徑是基于光強(qiáng)計(jì)算的數(shù)值,不要與其他方法產(chǎn)生的質(zhì)量或數(shù)量平均值相混淆。
 
  3 多分散指數(shù)
 
  多分散指數(shù)是無量綱的量。除去單分散的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),很少有樣品的PI<0.05。PI>0.7表明樣品粒度分布非常寬,可能并不適用于動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)。
 
  4 多分散度
 
  在光散射技術(shù)中,多分散度和多分散度百分?jǐn)?shù)由多分散指數(shù)推導(dǎo)出來。在累積分析法中,假設(shè)單一顆粒粒度,應(yīng)用單指數(shù)擬合自相關(guān)函數(shù),多分散度描述假設(shè)的高斯分布的寬度。在蛋白質(zhì)分析中,小于20%的分散度表明樣品是單分散的。
 
  5 擴(kuò)散系數(shù)
 
  懸浮液/溶液中的粒子和分子經(jīng)歷布朗運(yùn)動(dòng)。布朗運(yùn)動(dòng)是由于溶劑分子自身熱運(yùn)動(dòng)引起的撞擊所致。如果激光照射粒子或分子,則散射光強(qiáng)度的波動(dòng)依賴于粒子的大小,越小的粒子被溶劑分子撞擊得越遠(yuǎn),因此移動(dòng)更迅速。分析散射光強(qiáng)度的波動(dòng)獲得布朗運(yùn)動(dòng)的速度,使用Stokes-Einstein公式進(jìn)一步獲得顆粒粒徑。因此,擴(kuò)散系數(shù)定義特定的溶劑環(huán)境下,粒子的布朗運(yùn)動(dòng)。平移擴(kuò)散系數(shù)不僅取決于粒子“核”的大小,而且還依賴于介質(zhì)的表面結(jié)構(gòu),以及介質(zhì)中離子的濃度和類型。
 
  6 流體動(dòng)力學(xué)直徑
 
  由動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)測(cè)量的流體動(dòng)力學(xué)粒徑,被定義為“與被測(cè)粒子以相同方式進(jìn)行擴(kuò)散的硬球的大小”。實(shí)際中,溶液中的粒子或大分子是非球形的、動(dòng)態(tài)的。因此,由粒子擴(kuò)散特性計(jì)算的直徑為流體動(dòng)力學(xué)直徑。因此,流體動(dòng)力學(xué)直徑是與被測(cè)粒子有相同平移擴(kuò)散系數(shù)的球體的直徑,假設(shè)粒子或分子包含水化層。
 
  7 相關(guān)曲線或相關(guān)函數(shù)
 
  在動(dòng)態(tài)光散射實(shí)驗(yàn)中測(cè)量的數(shù)據(jù)應(yīng)該是光滑的相關(guān)曲線,在單一粒子的情況下,相關(guān)函數(shù)是單指數(shù)衰減函數(shù)。通過擬合相關(guān)函數(shù)曲線可以得到擴(kuò)散系數(shù)D,D與指數(shù)衰減時(shí)間成正比。已知擴(kuò)散系數(shù),可以通過Stokes-Einstein方程計(jì)算流體力學(xué)直徑。對(duì)多分散樣本,相關(guān)函數(shù)曲線的多個(gè)指數(shù)衰減函數(shù)的和。
 
  8 Y軸截距
 
  在動(dòng)態(tài)光散射實(shí)驗(yàn)中,Y軸截距是指相關(guān)曲線與y軸的交叉點(diǎn)。Y軸截距可以用來評(píng)估測(cè)量信號(hào)的信噪比,通常被用來判斷測(cè)量數(shù)據(jù)的質(zhì)量。對(duì)歸一化的相關(guān)函數(shù),理想信號(hào)的截距為1,截距超過0.6的為良好,大于0.9時(shí)為最佳系統(tǒng)。
 
  9 反卷積算法
 
  對(duì)光強(qiáng)自相關(guān)函數(shù)進(jìn)行反卷積運(yùn)算得到顆粒粒度分布,一般使用非負(fù)約束最小二乘算法進(jìn)行求解,常見算法為CONTIN。
 
  10 光子計(jì)數(shù)率
 
  光子計(jì)數(shù)率就是每秒探測(cè)到的光子數(shù)量。通過監(jiān)測(cè)其時(shí)間穩(wěn)定性,來確定樣本質(zhì)量,也可以用來設(shè)置儀器參數(shù),如調(diào)整衰減器和設(shè)置實(shí)驗(yàn)持續(xù)時(shí)間。計(jì)數(shù)率需要超過某最小值,以便有足夠的信號(hào)進(jìn)行分析,當(dāng)然,為保持線性,所有的探測(cè)器都有計(jì)數(shù)率的上限。
 
  11 光強(qiáng)分布
 
  動(dòng)態(tài)光散射實(shí)驗(yàn)的結(jié)果是顆粒的光強(qiáng)分布,是根據(jù)粒子的散射光強(qiáng)加權(quán)的。生物材料或聚合物粒子的散射光強(qiáng)與分子重量的平方成正比??梢允褂霉鈴?qiáng)分布來監(jiān)測(cè)樣品中是否混入大顆粒。
 
  12 體積分布
 
  雖然由DLS得到的是顆粒的光強(qiáng)分布,但可以利用米氏理論轉(zhuǎn)化為體積分布。由光強(qiáng)分布轉(zhuǎn)化為體積/質(zhì)量分布時(shí),必須接受4點(diǎn)假設(shè):
 
  1) 所有粒子是球形的
 
  2) 所有粒子是同質(zhì)的
 
  3) 已知粒子的光學(xué)性質(zhì),即折射率的實(shí)部和虛部
 
  4) 強(qiáng)度分布
 
  理解這些前提非常重要,事實(shí)上,光強(qiáng)分布總會(huì)有誤差,轉(zhuǎn)換過程又存在計(jì)算誤差,因此體積和數(shù)量分布只具有參考價(jià)值。對(duì)于分布比較窄的體系,三種分布變化不會(huì)太大,這種情況下用光強(qiáng)分布即可。但是當(dāng)存在大粒子的時(shí)候,比如灰塵,就要仔細(xì)對(duì)比分析應(yīng)該采用哪種分布。如果樣品包含兩種大小不同的顆粒,這個(gè)時(shí)候或許體積分布更合適,它表明了樣品是以什么樣的形式存在。
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